一、标本采集
(一)分泌物 灭菌棉拭从小阴唇内侧,阴道壁,后穹窿取分泌物。白色凝块或豆渣样分泌物检出率高。
(二)尿液 有尿道感染时,收集清晨中段尿10~20ml,以每分钟2000转离心15分钟后,取沉渣送检。
二、标本的运送
湿片直接镜捡的标本运送无特别要求,标本用做培养时则需将采集标本的拭子放入盛有1~2ml含氯霉素的灭菌生理盐水的小试管内,或接种与Stuart转送培养基,放4摄氏度冰箱保存。尿液标本用灭菌管采集,放4摄氏度冰箱保存。标本应尽早处理。
三、显微镜检查
将采集的标本放入盛有少量灭菌生理盐水的小试管内,取一滴放在载物片上,然后滴加10%KOH;或将采集标本的拭子直接涂在滴有10%KOH的载玻片上,使细胞散开;直接在100倍、400倍的显微镜下观察。必要时可将涂片固定后,作革兰氏染色,油镜观察。
念珠菌阳性者镜下可见略带淡绿色折光的假菌丝和成群的卵圆形芽孢,其直径约为3~5μm。假菌丝的菌丝节间有明显的狭窄部,芽孢往往集中于菌丝分隔处,偶可见到分隔的真菌丝。
革兰氏染色后假菌丝和芽孢均被染成紫色。假菌丝的狭窄不及孢子芽生的特征更为明显。有时仅有芽生孢子而无假菌丝,此时报告为芽生孢子阳性,可供临床医生参考。
涂片检查虽简便易行,有一定敏感性,但采集标本方法要准确,标本量要稍多;格兰染色时应仔细按照标准操作,尤其是脱色时间要把握好。